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LEICA SR GSD
Leica SR GSD 是奈米級的超解析顯微影像系統, SR GSD, 基態耗損 ( Ground State Depletion ) 技術, 將光學解析提升到 20 nm, 突破了阿貝光學繞射理論.

僅需一般螢光染劑, 簡易使用, 結合 Leica AM TIRF, DMI 6000 B, SuMo 抑制震動載物檯, 是一套最佳的超解析影像平台.

不僅可以作活細胞成像, 也可作即時的超解析成像. 使用成本低, 入門門檻極低. 每一個人都可輕易上手的影像系統.


Leica 辦到了 ! 讓超解析光學影像平台, 變得如此的簡易使用 ! 讓客戶專注在樣本, 得到前所未有的結果, 探索生命奧妙的最佳工具之一. 我們深信, 藉助 Leica SR GSD 即將改寫超高解析影像成像的歷史 !



Leica 團隊 與 Stefan Hell 合作, 開發出奈米級的超解析顯微影像系統, SR GSD, 基態耗損 ( Ground State Depletion ) 技術, 將光學解析提升到 20 nm, 突破了阿貝光學繞射理論. SR GSD 核心技術主要是將處在激發態的分子進一步激發到另一個不會產生螢光的三重態 (triplet state)。而由於三重態的 life time較長,若使用雷射連續光譜來激發,將會使所有基態的分子都會被箝制停留在不發螢光的三重態,我們稱之為基態耗盡。




GSD
STED 相比,主要的差別在於所需要的激發強度差異。GSD的三重態的壽命一般比激發態的壽命長許多,因此GSD 的飽和強度比起STED 來要小很多。GSD 則只需要 STED飽和強度數值的百分之一。 因此可以不必用瞬間強度很高的脈衝雷射,只要找到適當的螢光分子,有夠長的三重態壽命,用成本較低的連續波雷射,也可以完成突破繞射極限的顯微技術.


Figure 1: Principle of GSDIM microscopy.

Illustration of the exposed area of a sample in
classical widefield microscopy (A) or in GSDIM
microscopy (B + C) in which only a small number
of single dye molecules emit fluorescence.
The spheres represent individual dye molecules
 in fluorescent (green) or “off” mode (black).






在一些超解析影像系統, 基於雷射關係, 必須使用特殊的染劑, 種類極少, 應用嚴重受限. 然而, GSD 技術, 無需特殊的染劑, 與一般螢光染色無異, 也無須有特殊的樣品製備, 使用門檻極低, 卻也創造了最高的使用效益. 此外, 採用一般固態雷射, 無須使用高價昂貴的高速高功率的脈衝雷射, 也大大的降低使用成本, 維護成本.

Optimized sample preparation for GSDIM microscopy

The sample preparation for GSDIM microscopy is based on standard immunostaining techniques, although it requires some specific optimization. The ability to switch dyes into the dark triplet state is mainly dependent on the use of high energy laser systems for excitation and the use of reducing conditions in the embedding medium. As different dyes interact differently with the surrounding media, the embedding should be changed depending on the dye. Leica recommends Glucose-Oxidase Mix (containing glucose, glucose oxidase and catalase in a PBS buffer of pH = 7.4), or PVA-based (Polyvinyl alcohol) or MEA-based (ß-Mercaptoethylamine) embedding media


夢寐以求的超解析即時高清晰成像, 終於在 Leica SR GSD 嶄露無遺. 對活細胞或動態分子, 皆可作即時或長時間的超解析影像擷取. 可預見的, 會有出乎你預料的卓越成效.

Leica 獨家的 GSD 專屬物鏡, 也是 TIRF 物鏡的首選. HCX PL-APO 100x/1.47 OIL CORR. 配合自動聚焦控制, 是 GSD 的核心元件之一.


Using light to see and control membrane traffic.
Yingke Xu, Thomas J Melia, Derek K Toomre (2011)
Current opinion in chemical biology


 













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