LEICA 數位層光切片掃描 (DLS), 組織澄清影像專用物鏡

LEICA HC FLUOTAR L25x/1.00 IMM ( RI 1.457 ) motCORR VISIR
LEICA 獨家超高性能的組織澄清影像 (CLARITY) 專用物鏡,
用於 STELLARIS 8 DLS ( 雷射掃描共軛焦-數位層光切片掃描  或 多光子影像系統 ).

DLS 為 LEICA 獨家技術, 使用兩個物鏡, 垂直照明與雙折射垂直角度成像 (TwinFlect).

超長工作距離 6 mm, 涵蓋紅外光譜 (470-1200 nm, > 87% 穿透率 ), 專利的電動校正 (樣本與溶液) 折射率, 可以實現樣本最深層的影像擷取, 最廣的視野數 FOV 22 mm, 同時, 取得 Z-軸 (XY-Z) 最高的光學解析.





470 - 1200 nm ( IR ), 超過 87% 的光學穿透率. 可滿足 DLS 與 Multi-Photon 影像擷取, 可以做更深層的樣本影像擷取.


LEICA DLS - TwinFlect 工作原理

DLS TwinFlect 照明物鏡 :
LEICA HC PL-FLUOTAR 2.5x/0.07
LEICA HCX PL-FLUOTAR 5x/0.15




Lightsheet填補了傳統光學顯微鏡和MRI,CT等器官成像之間的空隙;在遺傳、發育等研究中有著較好的應用及前景.  Lightsheet的目標也是進行3D的樣本深層成像。與傳統上的雷射掃描共軛焦/多焦點轉盤共軛焦、雙光子影像相比,Lightsheet的優勢在於很小的光漂白(因為雷射掃描共聚焦/多焦點轉盤共軛焦都會掃到焦平面外的螢光探針)以及能夠觀察大到1 cm的樣品(雙光子影像僅有1 mm左右)。而且由於可以直接採用高解析度的相機直接對一個焦平面同時成像,所以針對較大樣品的時候速度也比共軛焦的掃描要更快。
 
LEICA Digital Light Sheet ( DLS ), 可以垂直照明與垂直雙折射角度成像, 速度快, 解析高, 深入樣本. 比傳統Light Sheet 更有優勢.



 


 
Cerebral cortex and hippocampus of adult Thy1-YFP-H mouse brain slice cleared with SeeDB2G. Images courtesy of Dr. Meng-Tsen Ke and Dr. Takeshi Imai, RIKEN Center , Kobe, Japan.

 

Low phototoxicity and specimen imaging in 3D: Development of Drosophila melanogaster over six hours. Probe: Light-sensitive RFP. 3D rendering. 150 µm z stack, 30sec/stack.
 

This example demonstrates the advantage of confocal combined with DLS. A transgenic Zebrafish embryo was labelled to visualize macrophages involved in immune responses. To investigate their behavior upon wounding, a confocal  laser was used to create a wound (arrow) and afterwards, a time-lapse movie was recorded. The video shows the dynamic reaction of the activated cells that are now migrating to the wound triggering the healing process. For this case, switching to DLS allows gentle live cell imaging of the Zebrafish

其他 DLS 專用物鏡




LEICA motCORR
獨家專利設計, 可以快速電控鏡頭內的鏡片, 微調焦距, 以補償因為下列因素造成的像差 :
1. 樣本與溶液建的折射率不匹配
2. 玻片厚度
3. 溫度產生焦點位移